The virologic surveillance of 4248 Charadriiformes since 1992 primarily from coastal northwest Australia did not detect any evidence of avian influenza virus (AIV) excretion (test prevalence  =  0%; 95% confidence interval [CI]: 0%–0.09%). Past exposure to AIV was evident from serologic testing using nucleoprotein (NP) competitive-ELISA (c-ELISA) with an overall seroprevalence of 8.8% (95% CI: 8%–9.7%). The c-ELISA seroprevalence of family Scolopacidae and genus Numenius was significantly higher when compared with other families and genera, respectively. Exposure risk profiles, based on c-ELISA seroprevalence, were compiled for 40 species with the following species having significantly higher values when compared with the combined value of all other species: eastern curlew (Numenius madagascariensis), whimbrel (Numenius phaeopus), ruddy turnstone (Arenaria interpres), grey plover (Pluvialis squatarola), little curlew (Numenius minutus), red knot (Calidris canutus), sharp-tailed sandpiper (Calidris acuminata), and red-necked stint (Calidris ruficollis). From hemagglutination inhibition (HI) testing, the more prevalent HI reactions were against H2, H5, H6, and H9 subtypes, with no reactions against subtypes H11, H14, H15, and H16. Serologic testing using c-ELISA provided species risk profiles for optimizing a surveillance strategy for AIV in diverse populations of wild birds. The paucity of knowledge about the role of waders in the ecology of AIV and the overall very low to negligible virus prevalence reported globally, and in this study, suggests that waders are spillover hosts in shared ecosystems with a lesser role than previously considered.

La vigilancia de Charadriiformes en el norte de Australia muestra variaciones entre especies con relación a la exposición al virus de la influenza aviar y sugiere una baja prevalencia del virus.

La vigilancia virológica de 4248 Charadriiformes desde el año 1992 principalmente en el noroeste de la costa de Australia no detectó evidencia de excreción del virus de la influenza aviar (AIV) (prevalencia de la prueba  =  0%; intervalo de confianza del 95% [IC]: 0%–0.09%). La exposición previa al virus de la influenza fue evidente por las pruebas serológicas mediante un método competitivo de ELISA (C-ELISA) para la nucleoproteína (NP), con una seroprevalencia general del 8.8% (95% IC: 8%–9.7%). La seroprevalencia por c-ELISA de la familia Scolopacidae y género Numenius fue significativamente mayor en comparación con otras familias y géneros, respectivamente. Los perfiles de riesgo de la exposición, basados en la prevalencia por c-ELISA, fueron recopilados para 40 especies, con las siguientes especies que mostraron valores significativamente más altos en comparación con el valor combinado de todas las demás especies: zarapito de Siberia (Numenius madagascariensis), zarapito trinador (Numenius phaeopus), vuelvepiedras común (Arenaria interpres), chorlito gris (Pluvialis squatarola), zarapito chico (Numenius minutus), playero rojizo (Calidris canutus), correlimos acuminado (Calidris acuminata) y correlimos cuellirrojo (Calidris ruficollis). De acuerdo con la prueba de inhibición de la hemaglutinación (HI), las reacciones de HI más prevalentes fueron contra los subtipos H2, H5, H6 y H9, y sin reacción contra los subtipos H11, H14, H15 y H16. Las pruebas serológicas utilizando el método de c-ELISA proporcionaron perfiles de riesgo para las especies, optimizando una estrategia de vigilancia del virus de influenza aviar en diversas poblaciones de aves silvestres. La escasez de conocimientos sobre el papel de las aves zancudas en la ecología de los virus de influenza aviar y la muy baja prevalencia en general del virus notificada en el mundo y en este estudio, sugiere que las aves zancudas son hospederos incidentales

Turkey viral hepatitis (TVH) is a disease characterized by an inflammation of the liver, and occasionally of the pancreas, of turkeys. Little is known about the occurrence of TVH in turkey flocks; thus, the aim of the present article is to summarize retrospectively 76 cases of TVH diagnosed at the California Animal Health and Food Safety System (CAHFS), University of California, Davis, in the years 2000 through 2012. Flocks diagnosed with TVH were between 7 and 61 days old, with an average age of 29.4 days and a median age of 28 days. In the majority of cases, increased mortality was reported. In 55 cases, gross lesions were present in the liver; the most common lesions were a few to numerous pale white foci in 35 cases. In livers of 74 cases, histologic lesions were observed. Multifocal necrosis with inflammation was observed in livers of 42 cases, inflammation but no necrosis in 22 cases, and necrosis without inflammation in 8 cases. In 17 cases, pale white foci were found in the pancreas; in 4 cases, larger areas of the organ were pale. In 33 cases, histologic changes were observed in the pancreas. Necrosis with inflammation was observed in the pancreas of 17 cases, necrosis without inflammation in 7 cases, and inflammation without necrosis in 9 cases. No Salmonella was isolated from any of the livers cultured. Transmission electron microscopy of liver and pancreas demonstrated viral particles between 23 and 25 nm in two cases. Concurrent diseases were mostly poult enteritis (65 cases), but also respiratory diseases and colibacillosis. TVH occurred more often in turkeys during winter months. In conclusion, TVH was observed on a regular basis in California turkey flocks during the last 12 yr.

Estudio retrospectivo de la hepatitis viral de los pavos en parvadas de pavos en California entre los años 2000 al 2012.

La hepatitis viral de los pavos (con las siglas en inglés TVH) es una enfermedad caracterizada por una inflamación del hígado, y ocasionalmente del páncreas, de los pavos. Poco se sabe acerca de la presentación de esta enfermedad en parvadas de pavos, por lo que el objetivo del presente artículo fue resumir de forma retrospectiva 76 casos de la hepatitis viral de los pavos diagnosticados en el Sistema de Salud Animal y Seguridad Alimentaria del estado de California (CAHFS), Universidad de California, Davis, entre los años 2000 al 2012. Las parvadas que fueron diagnosticadas con esta enfermedad tenían entre 7 y 61 días de edad, con una edad promedio de 29.4 días, y una mediana de 28 días. En la mayoría de los casos, se reportó aumento de la mortalidad. En 55 casos, las lesiones macroscópicas estuvieron presentes en el hígado; las lesiones más comunes fueron de escasos a abundantes focos de color blanco pálido en 35 casos. En los hígados de 74 casos, se observaron lesiones histológicas. Se observó necrosis multifocal con inflamación en los hígados de 42 casos, se observó inflamación, pero no necrosis en 22 casos, y necrosis sin inflamación en 8 casos. En 17 casos, se encontraron focos blancos pálidos en el páncreas, en 4 casos, grandes porciones del órgano estaban pálidas. En 33 casos, se observaron cambios histológicos en el páncreas. Se observó necrosis con inflamación en el páncreas en 17 casos, necrosis sin inflamación en 7 casos, e inflamación sin necrosis en 9 casos. No se aisló Salmonella de ninguno de los hígados cultivados. La microscopía electrónica de transmisión de hígado y páncreas demostró la presencia de partículas virales entre 23 y 25 nm en dos casos. Las enfermedades concurrentes eran en su mayoría enteritis de los pavipollos (65 casos), pero también enfermedades respiratorias y colibacilosis. La hepatitis viral de los pavos se presentó con más frecuencia en los pavos durante los meses de invierno. En conclusión, se observó la hepatitis viral de los pavos de forma regular en parvadas de pavos en California durante los últimos 1

Protective properties of three distinct infectious bronchitis virus (IBV) Ark Delmarva poultry industry (ArkDPI) S1 proteins encoded from replication-defective recombinant adenovirus vectors were investigated. Using a suboptimal dose of each recombinant virus, we demonstrated that IBV S1 amino acid sequences showing ≥95.8% amino acid identity to the S1 of the challenge strain differed in their ability at conferring protection. Indeed, the S1 sequence of the IBV population previously designated C4 (AdIBVS1.C4), which protected the most poorly, differs from the S1 sequence of population C2 (AdIBVS1.C2), which provided the highest protection, only at amino acid position 56. The fact that a change in one amino acid in this region significantly altered the induction of a protective immune response against this protein provides evidence that the first portion of S1 displays relevant immunoprotective epitopes. Use of an optimal dose of AdIBVS1.C2 effectively protected chickens from clinical signs and significantly reduced viral load after IBV Ark virulent challenge. Moreover, increased numbers of both IgA and IgG IBV-specific antibody secreting lymphocytes were detected in the spleen after challenge. The increased response detected for both IgA and IgG lymphocytes after challenge might be explained by vaccine-induced B memory cells. The fact that a single vaccination with Ad/IBVS1.C2 provides protection against IBV challenge is promising, because Ad-vectored vaccines can be mass delivered by in ovo inoculation using automated in ovo injectors.

La proteína S1 de poblaciones particulares del virus de la bronquitis infecciosa expresadas en adenovirus recombinantes confiere protección contra el desafío.

Se estudiaron las propiedades protectoras de tres diferentes proteínas S1 del virus de la bronquitis infecciosa serotipo ArkDPI que fueron codificadas en vectores de adenovirus recombinantes de replicación defectiva. Mediante el uso de una dosis subóptima de cada virus recombinante, se ha demostrado que las secuencias de aminoácidos de la proteína S1 que muestran una similitud mayor o igual al 95.8% con la proteína S1 de la cepa de desafío diferían en su capacidad para conferir protección. De hecho, la secuencia S1 de la población del virus de bronquitis previamente designado como C4 (AdIBVS1.C4), que indujo la menor protección y la secuencia S1 de la población C2 (AdIBVS1.C2) que proporcionó la máxima protección, diferían solamente en la posición de aminoácido 56. El hecho de que un cambio en un aminoácido en esta región alteró significativamente la inducción de una respuesta inmune protectora contra esta proteína, proporciona evidencia de que la primera porción de S1 muestra epítopes inmunoprotectores importantes. El uso de una dosis óptima de AdIBVS1.C2 protegió eficazmente a los pollos contra signos clínicos y significativamente redujo la carga viral después del desafío con una cepa Arkansas virulenta. Por otra parte, se detectaron números crecientes de linfocitos secretores de anticuerpos IgA e IgG específicos contra el virus de la bronquitis, detectados en el bazo después de la exposición. El aumento de la respuesta detectada para ambos linfocitos productores de IgA e IgG después de la exposición podría explicarse por las células B de memoria inducidas por la vacuna. El hecho de que una sola vacunación con el virus Ad/IBVS1.C2 proporciona protección frente al desafío con el virus de la bronquitis es prometedor, ya que las vacunas con vectores de adenovirus pueden ser aplicadas masivamente mediante inoculación in ovo utilizando inyectores automatizados.

Use of real-time PCR is increasing in the diagnosis of infectious disease due to its sensitivity, specificity, and speed of detection. These characteristics make it particularly suited for the diagnosis of viral infections, like avian metapneumovirus (AMPV), for which effective control benefits from continuously updated knowledge of the epidemiological situation. Other real-time reverse transcription (RT)-PCRs have been published based on highly specific fluorescent dye–labeled probes, but they have high initial cost, complex validation, and a marked susceptibility to the genetic variability of their target sequence. With this in mind, we developed and validated a SYBR Green I–based quantitative RT-PCR for the detection of the two most prevalent AMPV subtypes (i.e., subtypes A and B). The assay demonstrated an analytical sensitivity comparable with that of a previously published real-time RT-PCR and the ability to detect RNA equivalent to approximately 0.5 infectious doses for both A and B subtypes. The high efficiency and linearity between viral titer and crossing point displayed for both subtypes make it suited for viral quantification. Optimization of reaction conditions and the implementation of melting curve analysis guaranteed the high specificity of the assay. The stable melting temperature difference between the two subtypes indicated the possibility of subtyping through melting temperature analysis. These characteristics make our assay a sensitive, specific, and rapid tool, enabling contemporaneous detection, quantification, and discrimination of AMPV subtype A and B.

Un método de transcripción reversa y PCR en tiempo real para la detección de Metapneumovirus aviares subtipos A y B sensible, reproducible y económico.

El uso de PCR en tiempo real es cada vez mayor en el diagnóstico de enfermedad infecciosas, debido a su sensibilidad, especificidad y rapidez de detección. Estas características la hacen especialmente adecuada para el diagnóstico de las infecciones virales, como metapneumovirus aviares (aMPV), en donde se facilita el control mediante la constante actualización de la situación epidemiológica. Otras metodologías de transcripción reversa y PCR en tiempo real han sido publicadas con base en sondas altamente específicas marcadas con colorante fluorescentes, pero tienen alto costo inicial, su validación es compleja, y muestran una marcada susceptibilidad de acuerdo con la variabilidad genética de su secuencia blanco. Con esto en mente, se ha desarrollado y validado un método de RT-PCR cuantitativo basado en SYBR Green I para la detección de los dos subtipos aMPV más prevalentes (por ejemplo, los subtipos A y B). El ensayo demostró una sensibilidad analítica comparable con la de un método de RT-PCR en tiempo real publicado previamente y con capacidad de detectar ARN equivalente a aproximadamente 0.5 dosis infecciosas para ambos subtipos A y B. La alta eficiencia y linealidad entre la titulación viral y el punto de cruce para ambos subtipos muestra que el método es adecuado para la cuantificación viral. La optimización de las condiciones de reacción y la aplicación de análisis de la curva de fusión garantiza la alta especificidad del ensayo. La diferencia de temperatura de fusión estable entre los dos subtipos indicó la posibilidad de subtipificación a través del análisis de la temperatura de fusión. Estas características hacen de este ensayo una herramienta sensible, específica y rápida, lo que permite la detección simultánea, la cuantificación y la discriminación de metapneumovirus subtipos A y B.

An 18-yr-old male hyacinth macaw (Anadorhynchus hyacinthinus) was found dead in his aviary with no preexisting signs. The bird had a chronic history of feather damaging behavior, with severe ulcerative dermatitis. Pathologic findings revealed a vegetative valvular endocarditis, myocarditis, septicemia, chronic severe glomerulonephritis, and thyroid dysplasia. Staphylococcus aureus was isolated from the valve, the liver, and the skin. Repeated trauma and low-rate bacteriemia may have contributed to the development of endocarditis. Translocation of S. aureus skin infection in the bloodstream may lead to subacute endocarditis in humans and such mechanism is suspected in this case. This case suggests that endocarditis associated with S. aureus septicemia is a potential complication of feather damaging behavior. This case also reports a systemic complication of ulcerative dermatitis secondary to feather damaging behavior. Endocarditis has been poorly reported in psittacine species, and such medical complication of feather damaging behavior has never been reported to our knowledge. Furthermore, S. aureus is a bacteria of public health concern and should be integrated into the differential when pet parrots with dermatitis are in proximity to owners.

Dermatitis ulcerativa y endocarditis valvular asociada con Staphylococcus aureus en un guacamayo azul (Anadorhynchus hyacinthinus).

Un guacamayo azul o jacinto macho de 18 años de edad, (Anadorhynchus hyacinthinus) fue encontrado muerto en su aviario sin signos preexistentes. El ave tenía una historia crónica de comportamiento caracterizado por autolesión de las plumas, con dermatitis ulcerativa grave. Los hallazgos patológicos revelaron una endocarditis valvular vegetativa, miocarditis, septicemia, glomerulonefritis crónica severa y displasia de la tiroides. Se aisló Staphylococcus aureus de la válvula cardiaca, del hígado y de la piel. El trauma repetido y la bacteriemia de bajo nivel pudieron haber contribuido al desarrollo de la endocarditis. La translocación de la infección cutánea por S. aureus en el torrente sanguíneo puede conducir a endocarditis subaguda en los seres humanos y se sospecha de este mecanismo en este caso. Este caso sugiere que la endocarditis asociada con la septicemia por S. aureus es una complicación potencial del comportamiento de autolesión de las plumas. Este caso reporta una complicación sistémica de dermatitis ulcerativa secundaria a un comportamiento de autolesión de las plumas. No se ha reportado frecuentemente endocarditis en especies de psitácidos y esta complicación médica del comportamiento de autolesión de las plumas nunca se ha reportado de acuerdo con nuestro conocimiento. Por otra parte, S. aureus es una bacteria de preocupación para la salud pública y debe integrarse en el diferencial cuando loros mascotas con dermatitis se encuentran en proximidad con sus propietarios.

Hematologic and plasma biochemistry parameters of barn owls (Tyto alba) were studied in collaboration by the Exotic Division of the Faculty of Veterinary Science of the Szent Istvan University and the Eötvös Loránd University, both in Budapest, Hungary. Blood samples were taken from a total of 42 adult barn owls kept in zoos and bird repatriation stations. The following quantitative and qualitative hematologic values were determined: packed cell volume, 46.2 ± 4%; hemoglobin concentration, 107 ± 15 g/L; red blood cell count, 3.2 ± 0.4 × 10¹²/L; white blood cell count, 13.7 ± 2.7 × 10⁹/L; heterophils, 56.5 ± 11.5% (7.8 ± 2 ×10⁹/L); lymphocytes, 40.3 ± 10.9% (5.5 ± 1.9 × 10⁹/L); monocytes, 1.8 ± 2.1% (0.3 ± 0.3 × 10⁹/L); eosinophils, 1 ± 1% (0.1 ± 0.1 × 10⁹/L); and basophils, 0.6 ± 0.5% (0.1 ± 0.1 × 10⁹/L). The following plasma biochemistry values also were determined: aspartate aminotransferase, 272 ± 43 U/L; l-γ-glutamyltransferase, 9.5 ± 4.7 U/L; lipase, 31.7 ± 11.1 U/L; creatine kinase, 2228 ± 578 U/L; lactate dehydrogenase, 1702 ± 475 U/L; alkaline phosphatase, 358 ± 197 U/L; amylase, 563 ± 114 U/L; glutamate dehydrogenase, 7.5 ± 2.5 U/L; total protein, 30.6 ± 5.3 g/L; uric acid, 428 ± 102 µmol/L; and bile acids, 43 ± 18 µmol/L. These results provide reliable reference values for the clinical interpretation of hematologic and plasma biochemistry results for the species.

Intervalos de referencia hematológicas y de bioquímica plasmática de lechuzas comunes adultas sanas (Tyto alba).

Se estudiaron los parámetros hematológicos y de bioquímica plasmática de lechuzas comunes o también llamadas de campanarios (Tyto alba) con la colaboración de la División de Animales Exóticos de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Szent Istvan y de la Universidad Eötvös Loránd, ambas localizadas en Budapest, Hungría. Las muestras de sangre fueron tomadas de un total de 42 lechuzas adultas que se encontraban en zoológicos y en estaciones de refugio de aves. Se determinaron los siguientes valores hematológicos cuantitativos y cualitativos: volumen de hematocrito, 46.2 ± 4%; concentración de hemoglobina, 107 ± 15g/L; recuento de glóbulos rojos, 3.2 ± 0.4 × 10¹²/L; recuento de glóbulos blancos, 13.7 ± 2.7 × 10⁹/L; heterófilos, 56.5 ± 11.5% (7.8 ± 2 × 10⁹/L); linfocitos, 40.3 ± 10.9% (5.5 ± 1.9 × 10⁹/L); monocitos, 1.8 ± 2.1% (0.3 ± 0.3 × 10⁹/L); eosinófilos, 1 ± 1% (0.1 ± 0.1 × 10⁹/L) y basófilos, 0.6 ± 0.5% (0.1 ± 0.1 × 10⁹/L). También se determinaron los siguientes valores bioquímicos plasmáticos: aspartato aminotransferasa, 272 ± 43 U/L; L-γ-glutamil transferasa, 9.5 ± 4.7 U/L; lipasa, 31.7 ± 11.1 U/L; quinasa de creatina, 2228 ± 578 U/L; lactato deshidrogenasa, 1702 ± 475 U/L; fosfatasa alcalina, 358 ± 197 U/L; amilasa, 563 ± 114 U/L ; glutamato deshidrogenasa, 7.5 ± 2.5 U/L; proteína total, 30.6 ± 5.3 g/L; ácido úrico, 428 ± 102 µmol/L y ácidos biliares, 43 ± 18 µmol/L. Estos resultados proporcionan valores de referencia confiables para la interpretación clínica de resultados hematológicos y de bioquímica plasmática para dicha especie.

The serotype 1 Marek's disease virus (MDV) is the causative agent for Marek's disease (MD), a lymphoproliferative disease of chickens of great concern to the poultry industry. CVI988 (Rispens vaccine), an attenuated serotype 1 MDV, is currently the most efficacious commercially available vaccine for preventing MD. However, it is difficult to detect and differentiate CVI988 when other serotype 1 MDVs are present. To facilitate the detection of CVI988, we developed two sets of primers for a mismatch amplification mutation assay (MAMA) PCR that targeted the single nulceotide polymorphism associated with the H19 epitope of the phosphorylated protein 38 gene. The PCR was very specific. One primer set (oncogenic primers) amplified DNA from 15 different serotype 1 MDVs except CVI988. The other primer set (CVI988 primers) amplified DNA from CVI988 but not from any of the other 15 serotype 1 MDVs. A real-time PCR assay was developed using MAMA primers, and specificity and sensitivity was evaluated in vitro and in vivo. Mixtures of plasmids (CVI988 plasmid and oncogenic plasmid) at various concentrations were used to evaluate the sensitivity/specificity of MAMA primers in vitro. Both primer sets were able to amplify as little as one copy of their respective plasmid. Oncogenic primers were highly specific and only amplified CVI988 plasmid when the concentration of oncogenic plasmid was very low (1 × 10¹) and CVI988 plasmid was very high (1 × 10⁶). Specificity of CVI988 primers was not as high because they could amplify oncogenic plasmids when the concentration of CVI988 plasmid was 1 × 10³ and the concentration of oncogenic 1 × 10². Validation of MAMA primers in in vivo samples demonstrated that oncogenic primers can be used for both early diagnosis of MD in feather pulp (FP) samples collected at 3 wk of age and confirmation of MD diagnosis in tumors. CVI988 primers could be used to monitor CVI988 vaccination in samples with a low load of oncogenic MDV DNA (latently infected samples or negative) but not in samples with a high load of oncogenic MDV DNA (tumors). Our results suggest that monitoring CVI988 vaccination in FP samples collected at 1 wk of age ensures the specificity of the CVI988 primers.

Detección y diferenciación de la cepa CVI988 (Rispens Vacuna) de otras cepas del virus de la enfermedad de Marek pertenecientes al serotipo 1.

El serotipo 1 del virus de la enfermedad de Marek (MDV) es el agente causal de la enfermedad de Marek (MD), que es una enfermedad linfoproliferativa de los pollos de gran importancia para la industria avícola. La cepa CVI988 (vacuna Rispens), una vacuna atenuada del serotipo 1 del virus de Marek, es actualmente la vacuna más eficaz disponible comercialmente para prevenir la enfermedad de Marek. Sin embargo, es difícil de detectar y diferenciar la cepa CVI988 cuando otros virus de Marek del serotipo 1 están presentes. Para facilitar la detección de la cepa CVI988, se desarrollaron dos conjuntos de iniciadores para un ensayo de PCR para la amplificación de mutaciones por discrepancia de nucleótidos (con las siglas en inglés MAMA), dirigido al polimorfismo de nucleótido simple asociado con el gene del epítope H19 de la proteína fosforilada (PP) 38. El método de PCR fue muy específico. Un conjunto de iniciadores (primers oncogénicos) amplificó el ADN de 15 virus diferentes pertenecientes al serotipo 1 excepto la cepa CVI988. El otro conjunto de iniciadores (primers CVI988) amplificó el ADN de la cepa CVI988 pero ninguno de los otros 15 virus incluidos en el serotipo 1. Un ensayo de PCR en tiempo real fue desarrollado usando los iniciadores del ensayo MAMA y se evaluó la especificidad y sensibilidad in vitro e in vivo. Se usaron mezclas de plásmidos (plásmido CVI988 y el plásmido oncogénico) con varias concentraciones para evaluar la sensibilidad/especificidad d

Pathogenic strains of Enterococcus cecorum cause outbreaks of arthritis and osteomyelitis in chickens worldwide. Enterococcal spondylitis (ES) is a specific manifestation of E. cecorum-associated disease of broilers and broiler breeders characterized by increased flock mortality, resulting from unresolved infection of the free thoracic vertebra by pathogenic E. cecorum. A study of 22 ES outbreaks in the southeast United States revealed that pathogenic E. cecorum strains isolated from spinal lesions were genetically clonal. Here, we compare the virulence of previously genotyped pathogenic strains (n  =  8) isolated from spinal lesions and nonpathogenic strains (n  =  9) isolated from ceca of unaffected birds in a chicken embryo lethality model. Strains were inoculated into the allantoic cavity of 12-day-old broiler and specific-pathogen-free (SPF) layer embryos; embryo survival was determined by candling eggs daily for 4 days. Significantly decreased survival occurred in both broiler and SPF embryos inoculated with pathogenic genotype strains compared with embryos inoculated with nonpathogenic genotype strains (broiler embryos, 23% vs. 60%; SPF embryos, 9% vs. 61%). Embryos infected with pathogenic strains were unable to control infection and consistently showed gross changes typical of sepsis, including hemorrhage and edema. After 48 hr, similar changes were not observed in embryos infected with nonpathogenic strains. This embryo lethality assay provides a useful tool for understanding the genetic basis of E. cecorum virulence.

Ensayo de letalidad en embriones de pollo para cepas de Enterococcus cecorum patogénicas.

Las cepas patógenas de Enterococcus cecorum causan brotes de artritis y osteomielitis en pollos a nivel mundial. La espondilitis enterococócica (ES) es una manifestación específica de la enfermedad asociada con E. cecorum en pollos de engorde y en reproductoras pesadas que es caracterizada por alta mortalidad de la parvada, como resultado de la infección no resuelta en la vértebra torácica móvil causada por cepas de E. cecorum patógenas. Un estudio de 22 brotes de espondilitis enterococócica en el sureste de los Estados Unidos reveló que las cepas patógenas de E. cecorum aisladas de lesiones de la médula eran genéticamente provenientes de un clon. En este estudio, se comparó mediante un modelo de letalidad del embrión de pollo, la virulencia de las cepas patógenas previamente genotipificadas (n = 8) aisladas de lesiones de la columna vertebral y cepas no patógenas (n = 9) aisladas del ciego de las aves no afectadas. Las cepas fueron inoculadas en la cavidad alantoidea de embriones de pollo de 12 días de edad, de pollos de engorde y en aves libres de patógenos específicos (SPF); la supervivencia de los embriones se determinó por ovoscopía diariamente por cuatro días. De manera significativa se presentó una disminución en la supervivencia en ambos tipo embriones de pollos de engorde y de aves libres de patógenos específicos inoculados con cepas de genotipo patógeno en comparación con los embriones inoculados con cepas de genotipo no patógeno (embriones de pollos de engorde, 23% contra 60%; y en los embriones libres de patógenos específicos, 9% frente a 61%). Los embriones infectados con cepas patógenas fueron incapaces de controlar la infección y mostraron consistentemente cambios macroscópicos típicos de sepsis, incluyendo hemorragia y edema. Después de 48 horas, no se observaron cambios similares en los embriones infectados con cepas no patógenas. Este ensayo de letalidad del embrión proporciona una herramienta útil para la comprensión de la base genética de la virulencia de E. cecorum.

This study evaluated the effectiveness of bleach, Surface Decontamination Foam (SDF), and Virkon® in inactivating infectious bursal disease virus (IBDV) and Newcastle disease virus (NDV) at temperatures below 0 C. To simulate the influence of organic load on the effectiveness of disinfectants, as would be encountered in disinfecting farm vehicles and equipment, the viruses were suspended in preparations containing light or heavy levels of organic matter. A small volume of the viral suspension was applied to the upper surface of stainless steel carrier disks and these were then air dried. The dried virus inoculum was covered with disinfectant to which propylene glycol had been added to prevent freezing. The disks were incubated at various temperatures for periods up to 24 hr. With NDV, at −10 C all three disinfectants in both organic preparations achieved a 5 log ₁₀ reduction within 5 min. Results with SDF were similar at −25 and −10 C. To achieve comparable reduction with Virkon and bleach at −25 C, contact periods up to 2 or 24 hr, respectively, were required. With IBDV, to achieve a 5 log ₁₀ reduction by treatment with Virkon or SDF at −20 C, contact periods of 2 or 24 hr, respectively, were required in both organic preparations. It was concluded that at temperatures as low as −20 to −25 C, SDF was the most effective disinfectant for killing NDV and Virkon was most effective for killing IBDV. The finding that a contact period of up to 2 hr was required to kill IBDV, whereas NDV was killed within 5 min, attests to the greater stability of the former virus.

Inactivación del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa y de la enfermedad de Newcastle a temperaturas inferiores a cero Celsius utilizando desinfectantes químicos.

Este estudio evaluó la eficacia del cloro, de la espuma para descontaminación de superficies (con las siglas en inglés SDF) y del Virkon® para la inactivación del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa (IBDV) y del virus de la enfermedad de Newcastle (NDV), a temperaturas por debajo de 0°C. Para simular la influencia de la carga orgánica sobre la eficacia de desinfectantes, tal como se encuentra en la desinfección de los vehículos y maquinaria agrícola, los virus se suspendieron en preparados que contenían niveles de materia orgánica ligeros y pesados. Un pequeño volumen de la suspensión viral se aplicó a la superficie superior de discos de acero inoxidable y éstos se secaron al aire. El inóculo viral ya seco se cubrió con desinfectante al cual previamente se le agregó propilenglicol para evitar la congelación. Los discos se incubaron a diversas temperaturas durante períodos de hasta 24 horas. Con el virus de la enfermedad de Newcastle, los tres desinfectantes con ambas preparaciones orgánicas lograron una reducción de 5 log10 en 5 min a una temperatura de −10 C. Los resultados con SDF fueron similares a −25 y a −10 C. Para lograr reducción comparable con Virkon y con cloro a −25 C se requirieron períodos de contacto de hasta 2 o 24 horas, respectivamente. Con el virus de Gumboro, para lograr una reducción de 5 log 10 con el tratamiento con Virkon o con la espuma SDF a una temperatura de −20 C, se requirieron períodos de contacto de 2 o 24 h, respectivamente, para ambas preparaciones orgánicas. Se concluyó que a temperaturas tan bajas como entre −20 a −25 C, la espuma SDF fue el desinfectante más eficaz para inactivar al virus de Newcastle y el Virkon era más eficaz para inactivar al virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa. Se concluye que es necesario un período de contacto de hasta dos horas para matar al virus, mientras que el virus de Newcastle fue inactivado dentro de 5 min, lo que confirma la mayor estabilidad del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa.

American crows are acutely sensitive to West Nile virus (WNV) infection, and crow mortality has been used in WNV surveillance to monitor enzootic transmission. However, non-WNV sources of mortality could reduce the reliability of crow death as a surveillance tool. Here, using a combination of histopathologic, toxicologic, virologic, and molecular techniques we describe causes of mortality in 67 American crows (Corvus brachyrhynchos) that were collected from a population in the Sacramento Valley of California in 2012 and 2013. Evidence of infectious disease was detected in 70% (47/67) of carcasses. The majority of deaths were linked to a suite of non-WNV viral, bacterial, and fungal infections (39%; 23/59 cases), WNV (36%; 24/67 cases), and an acute toxic event (25%; 15/59 cases). Coinfections were detected in 20% (12/59) of birds and frequently were associated with WNV and poxviral dermatitis. Inferences about WNV activity based on crow mortality should be supported by laboratory confirmation because crow mortality frequently can be caused by other infectious diseases or toxic events.

Mortalidad por el virus del Nilo Occidental, mortalidad por otras causas y coinfecciones en cuervos americanos (Corvus brachyrhynchos) en California.

Los cuervos americanos son muy sensibles a la infección del virus del Nilo Occidental (con las siglas en inglés WNV), y la mortalidad en los cuervos se ha utilizado en la vigilancia de esta enfermedad para estudiar su transmisión enzootica. Sin embargo, otras causas de mortalidad diferentes del virus del Nilo Occidental podrían reducir la confiabilidad de la mortalidad de cuervos como herramienta de vigilancia. En este caso, mediante el uso de una combinación de histopatología, toxicología, virología y técnicas moleculares, se describen las causas de mortalidad en 67 cuervos americanos (Corvus brachyrhynchos) que fueron recolectados de una población en el Valle de Sacramento en California entre los años 2012 y 2013. Se detectó evidencia de la enfermedad infecciosa en el 70% (47/67) de las aves. La mayoría de las muertes estaban vinculadas a una serie de infecciones virales diferentes del virus del Nilo Occidental, bacterianas y micóticas (39%; 23/59 casos), por el virus del Nilo Occidental (36%; 24/67 casos) y toxicidad aguda (25%; 15/59 casos). Se detectaron coinfecciones en el 20% (12/59) de las aves y con frecuencia se asociaron con el virus del Nilo Occidental y con dermatitis por poxvirus. Las inferencias acerca de la actividad del virus del Nilo con base en la mortalidad de los cuervos deben ser apoyados por la confirmación en el laboratorio porque la mortalidad en estas aves con frecuencia puede ser causada por otras enfermedades infecciosas o eventos tóxicos.

Marek's disease (MD) is a lymphoproliferative disease of domestic chickens that is caused by a highly cell-associated oncogenic α-herpesvirus, Marek's disease virus (MDV). MDV replicates in chicken lymphocytes and establishes a latent infection within CD4 T cells. MD is characterized by bursal and thymic atrophy and rapid onset of T cell lymphomas that infiltrate lymphoid tissues, visceral organs, and peripheral nerves with severe clinical symptoms that include transient paralysis, anemia, weight loss, and neurologic disorders. The cecal tonsils (CT) are considered the largest lymphoid aggregates of avian gut-associated lymphoid tissue (GALT). Along with Peyer's patches, CT elicits protective immune responses against bacterial and viral pathogens in the intestinal tract of avian species. In this study we investigated the effect of MDV infection on CT structural changes and cytokine gene expression in two MD-susceptible and resistant chicken lines. The histopathologic analysis revealed that MDV causes the loss of germinal follicular centers within the CT of the resistant line while inducing a severe, near-total lymphoid depletion in the susceptible line during cytolytic infection. The lymphoid depletion, however, recovered approximately 2 wk postinfection but the loss of germinal centers persisted during the latent phase of infection in both lines. The atrophy of this important GALT was transient and there were no visible differences between the CT of the infected and control birds of either line by 21 days postinfection. Of the genes tested, IFN-β and IFN-γ were up regulated in the CT of both infected lines during lytic infection. The expression levels of both genes were much higher in the susceptible line than in the resistant line. A similar pattern of expression was observed for IL-6, IL-10, IL-13, and iNOS. IL-12 was up regulated in the CT of birds of the susceptible line during all three phases of infection. An over expression of IL-18 was also observed in CT of the susceptible line during lytic and latent phases of infection. IL-8 was the only cytokine expressed at higher levels in the CT of the resistant line during the lytic and reactivation phases of infection. The histopathologic observations and gene expression profiling are further discussed.

Atrofia transitoria de las tonsilas cecales inducida por el virus de la enfermedad de Marek.

La enfermedad de Marek (MD) es una enfermedad linfoproliferativa de los pollos domésticos que es causada por un α-herpesvirus oncogénico altamente asociado a células, denominado virus de la enfermedad de Marek (MDV). El virus de la enfermedad de Marek se replica en los linfocitos de pollo y establece una infección latente en las células T CD4 . El virus de Marek se caracteriza por producir bursitis, atrofia del timo y rápida aparición de linfomas de células T que se infiltran en los tejidos linfoides, en los órganos viscerales y en los nervios periféricos, produciendo signos clínicos severos que incluyen parálisis transitoria, anemia, pérdida de peso y trastornos neurológicos. Las tonsilas cecales se consideran los agregados de tejido linfoide más grandes asociados al intestino aviar (con las siglas en inglés GALT). Junto con las placas de Peyer, las tonsilas cecales inducen respuestas inmunes protectoras contra patógenos bacterianos y virales en el tracto intestinal de las especies aviares. En este estudio se investigó el efecto de la infección por el virus de Marek en los cambios estructurales de las tonsilas cecales y en la expresión genética de citocinas en dos líneas de pollos, una susceptible y la otra resistente al virus de Marek. El análisis histopatológico reveló que el virus de Marek provoca la pérdida de los centros germinales foliculares dentro de las tonsilas cecales de la línea resistente, mientras que induce una despoblación linfoide severa y casi total en la línea susceptible durante la infección

Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) causes huge annual losses in the poultry industry worldwide. Multiresistance against antibiotics of APEC strains is increasingly seen in broilers, although much is still unknown about strains from laying hens where use of antibiotics is limited. Disinfection can reduce the infection burden. However, little is known about the presence of resistance against these products. Ninety-seven APEC strains were isolated from Belgian laying hens. The resistance to different classes of antibiotics was determined as well as the minimum inhibitory concentrations (MIC; agar and broth dilution) and minimum bactericidal concentrations (MBC) of five disinfectants most often used in the poultry industry (formaldehyde, glutaraldehyde, glyoxal, hydrogen peroxide, and a quaternary ammonium compound). The presence of integrons was determined by PCR. Resistance to ampicillin (35.1%), nalidixic acid (38.1%), sulfonamides (SULFA, 41.2%), and tetracycline (TET, 53.6%) was high but resistance to other tested antibiotics was low. Nevertheless, two extended spectrum beta-lactamase producers were found. The MIC of the disinfectants for the APEC strains showed a Gaussian distribution, indicating that there was no acquired resistance. MBCs were similar to MICs via the broth dilution method, showing the bactericidal effect of the disinfectants. Twenty-one strains (21.6%) were found positive for class 1 integrons and a positive association between integron presence and resistance to trimethoprim, SULFA, and TET was found. No association could be found between integron presence and phylogenetic group affiliation. Susceptibility of APEC strains from laying hens to antibiotics is, in general, very high. Phenotypic resistance to commonly used disinfectants could not be found, indicating that the current use of disinfectants in the laying hen industry did not select for resistance.

Susceptibilidad a los antibióticos, desinfectantes y prevalencia de integrones de Escherichia coli patógena aviar de aves de postura en Bélgica.

La Escherichia coli patógena aviar (con las siglas en inglés APEC) causa enormes pérdidas anuales en la industria avícola de todo el mundo. La resistencia múltiple a los antibióticos por las cepas de E. coli patógenas aviares se observa cada vez más en los pollos de engorde, aunque queda mucho por conocer sobre las cepas de gallinas ponedoras donde el uso de antibióticos es limitado. La desinfección puede reducir la carga de la infección. Sin embargo, poco se sabe acerca de la presencia de resistencia en contra de estos productos. Noventa y siete cepas de E. coli patógenas aviares fueron aisladas de gallinas ponedoras en Bélgica. La resistencia a las diferentes clases de antibióticos se determinó así como las concentraciones mínimas inhibitorias (CMI; con diluciones en agar y en caldo) y las concentraciones mínimas bactericidas (MBC) de cinco desinfectantes que se utilizan más a menudo en la industria avícola (formaldehído, glutaraldehído, glioxal, peróxido de hidrógeno y un compuesto cuaternario de amonio). La presencia de integrones se determinó mediante PCR. La resistencia a la ampicilina (35.1%), ácido nalidíxico (38.1%), sulfonamidas (SULFA, 41.2%) y tetraciclina (TET, 53.6%) fueron altas, pero la resistencia a otros antibióticos analizados fue baja. Sin embargo, se encontraron dos productores de beta-lactamasas de espectro extendido. La concentración mínima inhibitoria de los desinfectantes para las cepas de E. coli patógenas aviares mostró una distribución de Gauss, lo que indica que no había resistencia adquirida. Las concentraciones mínimas bactericidas fueron similares a las concentraciones mínimas inhibitorias a través del método de dilución en caldo, que muestra el efecto bactericida de los desinfectantes. Veintiún cepas (21.6%) resultaron positivas para la clase 1 de integrones y se encontró

Infectious bronchitis virus (IBV) is a highly contagious coronavirus prevalent in all countries with an extensive poultry industry and continues to cause economic losses. IBV strains of the Ark serotype are highly prevalent in the Southeastern United States despite extensive vaccination. One explanation for this observation is the high genetic variability of IBV. In addition, IBV Ark-type vaccines may induce suboptimal mucosal immune responses, contributing to the prevalence and persistence of the Ark serotype. To test this hypothesis, chickens were ocularly vaccinated with a commercially available live attenuated IBV Ark–Delmarva Poultry Industry vaccine strain and both mucosal and systemic antibody responses were measured. The highest immunoglobulin A (IgA) spot-forming cell (SFC) response was observed in the Harderian glands (HG) and to a lesser extent in the spleen and conjunctiva-associated lymphoid tissues, while a limited IgG SFC response was observed in either the mucosal or systemic immune compartment. Interestingly, the peak IgA SFC response occurred 2 days earlier in spleen than in the head-associated lymphoid tissues despite ocular vaccination. Furthermore, IgA IBV-specific antibody levels significantly increased over controls 3 days earlier in tears and 4 days earlier in plasma than did IgG antibodies. IgA antibody levels were higher than IgG antibody levels throughout the primary response in tears and were similar in magnitude in plasma. In addition, a very early increase in IgA antibodies on day 3 postvaccination was observed in tears; such a response was not observed in plasma. This early increase is consistent with a mucosal T-independent IgA response to IBV. In the secondary response the IBV antibody levels significantly increased over controls starting on day 1 after boosting, and the IgG antibody levels were higher than the IgA antibody levels in both tears and plasma. In summary, ocular vaccination induced higher IgA antibodies in the primary IBV response, while the memory response is dominated by IgG antibodies. Thus, lower mucosal IgA antibody levels are observed upon secondary exposure to IBV, which may contribute to vulnerability of host epithelial cells to infection by IBV and persistence of the Ark serotype.

La inmunoglobulina A como una respuesta humoral temprana después de la vacunación en las mucosas con coronavirus aviar.

El virus de la bronquitis infecciosa (IBV) es un coronavirus muy contagioso prevalente en todos los países con una industria avícola extensa y sigue causando pérdidas económicas. Las cepas del virus de bronquitis del serotipo Arkansas son altamente prevalentes en el sureste de los Estados Unidos a pesar de la vacunación extensiva. Una explicación de esta observación es la alta variabilidad genética del virus de bronquitis. Además, las vacunas del tipo Arkansas pueden inducir respuestas inmunitarias subóptimas en las mucosas, que contribuyen a la prevalencia y persistencia del serotipo Arkansas. Para comprobar esta hipótesis, los pollos fueron vacunados ocularmente con una cepa vacunal viva atenuada disponible comercialmente del serotipo Arkansas DPI (Delmarva Poultry Industry) y las respuestas inmunitarias de las mucosas y de anticuerpos sistémicos fueron medidas. El sitio de células formadoras de inmunoglobulina A con mayor producción se observó en la glándula de Harder y en menor medida en el bazo y en los tejidos linfoides asociados a la conjuntiva, mientras que se observó una limitada respuesta de los sitios de células formadoras de IgG, ya sea en la mucosa o en el compartimento inmune sistémico. De manera interesante, el pico de respuesta de los sitios celulares formadores de IgA se produjo dos días antes en el bazo que en los tejidos linfoides asociados con la cabeza a pesar de que la vacunación fue por vía ocular. Por otra parte, los niveles de anticuerpos IgA específicos contra el virus de bronquitis aumentaro

Marek's disease (MD) virus (MDV) is an alphaherpesvirus that causes MD, a lymphoproliferative disease in chickens. Pathotyping has become an increasingly important assay for monitoring shifts in virulence of field strains; however, it is time-consuming and expensive, and alternatives are needed to provide fast answers in the face of current outbreaks. The purpose of this study was to determine whether differences in virus replication between pathotypes that have been reported using a small number of virulent (v) and very virulent plus (vv ) MDV strains could be confirmed with a large collection of MD viruses. Based on pilot study data, bursa, brain, and lung samples were collected at 9 and 11 days postinoculation (dpi) from birds challenged with 1 of 15 MDV strains. The correlation between virus replication and virulence was confirmed between vMDV strains and higher virulent strains, but in most cases, there was no significant difference between very virulent (vv) and vv MDV groups. At both 9 and 11 dpi, chickens infected with vv and vv MDV had significantly lower body weights and relative thymus and bursa weights compared with chickens challenged with vMDV. However, similar to virus quantity, there was no significant difference between weights in birds challenged with vv or vv MDV. The significant differences observed in maternal antibody negative (ab−) chickens were not significant in maternal antibody positive (ab ) chickens, demonstrating the requirement of ab− birds for this type of comparison. These data do not support the use of virus replication or organ weights as an alternative to pathotyping for discrimination between all three virulent MDV pathotypes but may be useful for determining a virus replication threshold to choose which field strains meet a minimum virulence to be pathotyped by traditional methods.

Correlación entre el patotipo del virus de la enfermedad de Marek y su replicación.

El virus de la enfermedad de Marek es un herpesvirus alfa que causa la enfermedad de Marek, que es una enfermedad linfoproliferativa en pollos. La tipificación patogénica se ha convertido en un ensayo cada vez más importante para el seguimiento de los cambios en la virulencia de las cepas de campo, sin embargo, requiere de mucho tiempo y es costosa, por lo tanto se necesitan alternativas para obtener respuestas rápidas durante los brotes actuales. El propósito de este estudio fue determinar si las diferencias en la replicación entre los patotipos que han sido reportadas para un número reducido de cepas virulentas (v) y de cepas muy virulentas plus (vv ) pueden ser confirmadas con una colección mayor de cepas del virus de la enfermedad de Marek. Con base en los datos de un estudio piloto, muestras de bolsa de Fabricio, cerebro y pulmón fueron recolectadas a los nueve y once días después de la inoculación (dpi) de las aves desafiadas con una de quince cepas diferentes del virus de Marek. La correlación entre la replicación del virus y la virulencia entre cepas se confirmó en cepas virulentas (vMDV) y cepas muy virulentas, pero en la mayoría de los casos, no hubo diferencia significativa entre los grupos de cepas muy virulentas (vv) y muy virulentas plus (vv ). A los nueve y once días después de la inoculación, los pollos infectados con las cepas muy virulentas y muy virulentas plus mostraron pesos corporales significativamente más bajos y los pesos relativos del timo y de la bolsa fueron comparables con los observados en los pollos desafiados con cepas virulentas de Marek. Sin embargo, de manera similar a la cantidad de virus, no había diferencia significativa entre los pesos en aves desafiadas con cepas muy virulentas o muy virulentas plus. Las diferencias significativas observadas en los pollos sin anticuerpos maternos fueron no significativas en los pollos con inmunidad materna, lo que demuestra la necesidad de utilizar aves sin inmunidad materna para este tipo de c

The bacterium Avibacterium paragallinarum is the etiologic agent of infectious coryza of chickens. Among the nine Kume serovars currently recognized in this bacterium, serovar B-1 is a common serovar in the Americas. In the current study, serovar B-1 isolates from Ecuador (seven isolates), Mexico (seven isolates) and Panama (two isolates) were genotyped. In addition one Panamanian, one Ecuadorian, and two Mexican isolates were used in a vaccination-challenge trial in which the vaccine was based on the 2671 serovar B-1 reference strain. Genotyping by enterobacterial repetitive intergenic consensus-based PCR (ERIC-PCR) resulted in ten distinguishable ERIC patterns for the 16 isolates and the two reference strains of Av. paragallinarum included in the study. No ERIC patterns were shared among isolates of the three different countries. In the vaccination-challenge trial, one isolate from Panama showed a significantly lower virulence than did the three other isolates. In terms of cross-protection, chickens vaccinated with reference strain 2671 and challenged with an Ecuadorian strain showed 40% protection, a significantly lower protection than the homologous protection level. The other three field isolates gave a similar protection level to the homologous challenge.

Nota de Investigación–Genotipificación, patogenicidad e inmunogenicidad de aislamientos de Avibacterium paragallinarum serovar B-1 de América Latina.

La bacteria Avibacterium paragallinarum es el agente etiológico de la coriza infecciosa de los pollos. Entre las nueve serovariedades de Kume actualmente reconocidas en esta bacteria, el serovar B-1 es común en América Latina. En el presente estudio, se genotipificaron aislamientos del serovar B-1 procedentes de Ecuador (siete aislamientos), de México (siete aislamientos) y de Panamá (dos aislamientos). Además uno de Panamá, uno de Ecuador y dos aislamientos de México se utilizaron en un ensayo de vacunación y desafío donde la vacuna consistía en la cepa de referencia 2671 del serovar B-1. La genotipificación mediante un método de PCR para las regiones consensuadas intergénicas repetitivas de enterobacterias (con las siglas en inglés ERIC-PCR) mostró diez patrones de ERIC diferentes de los 16 aislamientos y de las dos cepas de referencia de Av. paragallinarum incluidos en el estudio. No se observaron patrones de ERIC compartidos entre los aislamientos de los tres diferentes países. En el ensayo de vacunación y desafío, una cepa de Panamá mostró una virulencia significativamente menor en comparación con las otras tres cepas. En términos de protección cruzada, los pollos vacunados con la cepa de referencia 2671 y desafiados con una cepa de Ecuador mostraron una protección del 40%, una protección significativamente más baja en comparación con el nivel de protección homóloga. Los otros tres aislamientos de campo dieron un nivel de protección similar a la exposición homóloga.

Multiple common avian infectious diseases (CAIDs), namely, avian infectious diseases excluding highly pathogenic avian influenza and Newcastle disease, such as avian salmonellosis and coccidiosis, cause huge economic loss in poultry production and are of great significance in public health. However, they are usually not covered in the systems for reporting of animal diseases. Consequently, the distribution of CAIDs is not clear in many countries. Here, we report a clinical survey of CAIDs in China based on clinical diagnosis of eight veterinary clinics in 2011 and 2012. This survey provided the distribution data of viral, bacterial, and parasitic CAIDs in different types of avian flocks, seasons, and regions, data that are of great value in the research, prevention, and control of poultry diseases. This survey suggested that avian colibacillosis, infectious serositis in ducks caused by Riemerella anatipestifer, avian salmonellosis, fowl cholera, avian mycoplasmosis, avian aspergillosis, coccidiosis, low pathogenic avian influenza, infectious bronchitis, infectious bursal disease, and infectious laryngotracheitis are likely to be prevalent in the poultry in China.

Nota de Investigación—Estudio clínico de enfermedades infecciosas aviares comunes en China.

Múltiples enfermedades infecciosas aviares comunes (CAIDs), donde se excluye a la influenza aviar altamente patógena y a la enfermedad de Newcastle y donde se incluye a la salmonelosis aviar y a la coccidiosis, causan enormes pérdidas económicas en la producción avícola y son de gran importancia en la salud pública. Sin embargo, por lo general estas enfermedades no están cubiertas en los sistemas de notificación de enfermedades de los animales. En consecuencia, la distribución de estas enfermedades infecciosas no está clara en varios países. Aquí, se presenta un estudio clínico de enfermedades infecciosas aviares en China basado en el diagnóstico clínico de ocho clínicas veterinarias entre los años 2011 y 2012. Esta encuesta proporcionó los datos de distribución de enfermedades infecciosas virales, bacterianas y parasitarias en diferentes tipos de parvadas, de estaciones y de regiones. Estos datos son de gran valor en la investigación, prevención y control de las enfermedades de las aves. Esta encuesta sugiere es probable que la colibacilosis aviar, la serositis infecciosa en patos causada Riemerella anatipestifer, la salmonelosis aviar, cólera aviar, mycoplasmosis aviar, aspergilosis aviar, coccidiosis, influenza aviar de baja patogenicidad, bronquitis infecciosa, enfermedad infecciosa de la bolsa y la laringotraqueitis infecciosa sean prevalentes en la avicultura en China.

A total of 170 birds of prey admitted to two Wildlife Rescue and Rehabilitation Centers of Italy were examined. Birds were divided by diurnal (n  =  15) and nocturnal (n  =  7) species, sampled by cloacal swabs, and examined for Campylobacter spp. by cultural and molecular methods. Campylobacter spp. were isolated in 43 out of the 170 (25.3%) birds of prey examined. Among these, 43/43 (100%) were identified as Campylobacter jejuni and 10/43 (23.3%) were identified as Campylobacter coli recovered from mixed infections. Diurnal birds of prey showed a significantly higher prevalence value (P  =  0.0006) for Campylobacter spp. than did nocturnal birds of prey.

Nota de Investigación—Campylobacter spp. y las aves de presa.

Se examinaron un total de 170 aves de presa admitidas en los Centros de Rescate y Rehabilitación de Especies Silvestres en Italia. Las aves fueron divididas en especies diurnas (n  =  15) y nocturnas (n  =  7) que fueron muestreadas por hisopos de cloaca, y estos fueron examinados para Campylobacter spp., mediante métodos de cultivo y moleculares. Se aisló Campylobacter spp. en 43 de las 170 (25.3%) aves de presa examinadas. Entre estos aislamientos, 43/43 (100%) fueron identificados como Campylobacter jejuni y 10/43 (23.3%) fueron identificados como Campylobacter coli recuperado de infecciones mixtas. Las aves de presa diurnas mostraron un valor de prevalencia significativamente mayor (P  =  0.0006) para Campylobacter spp. en comparación con las aves de presa nocturnas.

Avian paramyxoviruses (APMVs) are classified into nine different serotypes (APMV 1–9). Virulent strains of APMV-1 are already well characterized as the etiologic agent of Newcastle disease (ND), an important disease in poultry that is potentially capable of infecting all orders of avian species. However, very little is known about the other eight serotypes, the majority of which can cause disease in domestic birds. The role of synanthropic and semi–free-range birds as reservoirs of avian paramyxoviruses is not well understood and the main objective of this work was to evaluate the seroprevalence of APMV 1–9 in these kind of birds. A total of 296 sera, oropharyngeal swabs, and cloacal enemas were collected from semi–free-range birds belonging to four different species: feral pigeons (Columba livia var. domestica), hybrid ducks (Anas sp.), domestic geese (Anser anser domesticus), and white storks (Ciconia ciconia). Antibodies against NDV were found in 56.3% of domestic geese, 42.9% of feral pigeons, and 30.4% of hybrid ducks. Antibodies for other APMVs (-3, -4, -6, -7, -8, -9) were also found. Seven positive individuals were positive to real-time RT-PCR detection, all of them feral pigeons captured in 2006 and 2007. The results obtained reinforce the idea that semi–free-range birds may be good sentinels for the detection of NDV and other avian paramyxoviruses.

Nota de Investigación—Seroprevalencia de paramixovirus en aves sinantrópicas y en aves mantenidas en semilibertad.

Los paramixovirus aviares (APMVs) se clasifican en nueve serotipos diferentes (APMV 1–9). Las cepas virulentas del paramixovirus aviar serotipo 1 (APMV-1) ya están bien caracterizadas como el agente etiológico de la enfermedad de Newcastle (ND), una enfermedad importante en la avicultura que es potencialmente capaz de infectar a todos los órdenes de las especies aviares. Sin embargo, se sabe muy poco acerca de los otros ocho serotipos, la mayoría de los cuales pueden causar enfermedades en aves domésticas. El papel como reservorios de paramixovirus aviares de las aves sinantrópicas y en condiciones de semilibertad no se ha comprendido adecuadamente y el objetivo principal de este trabajo fue evaluar la seroprevalencia de los paramyxovirus aviares serotipos 1 al 9 en este tipo de aves. Se recolectaron un total de 296 sueros, hisopos orofaríngeos y enemas cloacales de aves en semilibertad pertenecientes a cuatro especies diferentes: palomas domésticas (Columba livia var. domestica), patos híbridos (Anas sp.), gansos domésticos (Anser anser domesticus) y cigüeñas blancas (Ciconia ciconia). Se encontraron anticuerpos contra el virus de Newcastle en el 56.3% de los gansos domésticos, en el 42.9% de las palomas y en el 30.4% de los patos híbridos. También se encontraron anticuerpos para otros paramyxovirus aviares (-3, -4, -6, -7, -8, -9). Siete individuos positivos también fueron positivos para detección por transcripción reversa y PCR en tiempo real, todas estas aves fueron palomas capturadas entre los años 2006 y 2007. Los resultados obtenidos refuerzan la idea de que las aves en semilibertad pueden ser buenos centinelas para la detección del virus de la enfermedad de Newcastle y de otros paramixovirus.

During 2007, two outbreaks of avian influenza virus (AIV) in backyard and commercial ostrich flocks were first reported in the Kingdom of Saudi Arabia (KSA). The infected ostriches suffered from depression, anorexia, and diarrhea and some exhibited sudden death. A rapid AIV-group antigen detection and real-time reverse-transcription PCR (rtRT-PCR) were initially performed on cloacal and tracheal swabs collected from diseased birds. Pools from positive-tested swabs for each flock were utilized for virus isolation in specific-pathogen-free embryonating chicken eggs. H5N1 AIV was identified in the harvested allantoic fluids by hemagglutination followed by hemagglutination inhibition and rtRT-PCR. The viruses responsible for these two outbreaks were sequenced and characterized as HPAIV H5N1 (A/ostrich/Saudi Arabia/6732-3/2007 and A/ostrich/Saudi Arabia/3489-73VIR08/2007) from backyard and commercial flocks, respectively. Phylogenetic analysis of both isolates revealed that the two viruses belong to clade 2.2 sublineage II and cluster with the HPAIV H5N1 isolated from falcons and turkeys during 2007 in KSA.

Nota de Investigación—Caracterización y análisis filogenético de un virus altamente patógeno de influenza aviar H5N1 aislado de avestruces enfermas (Struthio camelus) en el Reino de Arabia Saudita.

Durante el año 2007, dos brotes del virus de la influenza aviar en parvadas de avestruces de traspatio y comerciales se reportaron por primera vez en el Reino de Arabia Saudita (KSA). Los avestruces infectados sufrieron depresión, anorexia y diarrea y algunos exhibieron muerte súbita. Inicialmente se realizaron una detección rápida por antígeno de grupo del virus de influenza y también un método de transcripción reversa y PCR en tiempo real (rtRT-PCR) a partir de hisopos cloacales y traqueales recolectados de las aves enfermas. Las muestras agrupadas de hisopos de cada parvada que resultaron positivas se utilizaron para el aislamiento del virus en huevos embrionados de pollo libres de agentes patógenos específicos. Se identificó un virus de influenza aviar subtipo H5N1 en los líquidos alantoideo cosechados mediante hemaglutinación seguido de inhibición de la hemaglutinación y rtRT-PCR. Los virus responsables de estos dos brotes fueron secuenciados y caracterizados como virus altamente patógenos subtipo H5N1 (A/avestruz/Arabia Saudita/6732-3/2007 y A/avestruz/Arabia Saudita/3489-73VIR08/2007) que se detectaron en parvadas de traspatio y comerciales, respectivamente. El análisis filogenético de las dos cepas reveló que los dos virus pertenecen al clado 2.2 sublinaje II y se agruparon con el virus de influenza de alta patogenicidad H5N1 aislado de halcones y pavos durante el año 2007 en el Reino de Arabia Saudita.

Periodic monitoring of poultry flocks in the United States via molecular diagnostic methods has revealed a number of potential enteric viral pathogens in continuous circulation in turkeys and chickens. Recently turkey integrators in the Southeastern United States and Arkansas experienced an outbreak of moderate to severe enteritis associated with turkey enteric coronavirus (TCoV), and numerous enteric samples collected from turkey flocks in these areas tested positive for TCoV via real-time reverse-transcriptase PCR (RRT-PCR). This report details the subsequent sequence and phylogenetic analysis of the TCoV spike glycoprotein and the comparison of outbreak-associated isolates to sequences in the public database. TCoVs investigated during the present outbreak grouped geographically based upon state of origin, and the RRT-PCR assay was a good indicator of subsequent seroconversion by TCoV-positive turkey flocks.

Nota de Investigación—Investigación de coronavirus entéricos de pavos que estaban circulando en el sureste de los Estados Unidos y en Arkansas durante los años 2012 y 2013.

El muestreo periódico de parvadas avícolas en los Estados Unidos mediante métodos de diagnóstico molecular ha revelado una serie de patógenos vírales entéricos potenciales que circulan continuamente en pavos y pollos. Recientemente los integradores de pavo en el sureste de los Estados Unidos y en Arkansas experimentaron un brote de enteritis de moderada a severa asociada con un coronavirus entérico de los pavos (TCoV), numerosas muestras entéricas recolectadas de las parvadas de pavos en estas áreas resultaron positivas al coronavirus de los pavos mediante transcripción reversa y PCR en tiempo real (RRT -PCR). Este reporte detalla la secuenciación y el análisis filogenético de la glicoproteína de las espículas del coronavirus de los pavos y compara los aislamientos asociados con brotes con las secuencias de una base de datos pública. Los coronavirus de pavos analizados durante un brote reciente se agruparon geográficamente en función del estado de origen. El ensayo de PCR en tiempo real fue un buen indicador de la seroconversión posterior de los lotes positivos al coronavirus de los pavos.

Streptococcus gallolyticus, previously known as Streptococcus bovis biotypes I and II/2, is a well-known cause of sepsis and meningitis in humans and birds. The present case report describes an outbreak of fatal septicemia associated with S. gallolyticus subsp. pasteurianus (S. bovis biotype II/2) in 11 turkey flocks in Pennsylvania between 2010 and 2013. Affected poults were 2–3 wk of age. Major clinical observation was sudden increase in mortality among turkey poults without any premonitory clinical signs. Postmortem examination findings revealed acute septicemia with lesions such as fibrinous pericarditis, meningitis, splenic multifocal fibrinoid necrosis, hepatitis, osteochondritis, myositis, and airsacculitis. Gram-positive cocci were isolated from several organs by routine bacterial culture. Biotyping identified bacteria as streptococci, whereas 16S ribosomal RNA gene sequencing identified them as S. gallolyticus subsp. pasteurianus. Antibiotic susceptibility profiles revealed that all the strains isolated were sensitive to penicillin and erythromycin with different sensitivity profiles for other antibacterial agents tested. The present study reports the first confirmed case of acute septicemia in turkey poults caused by S. gallolyticus subsp. pasteurianus.

Reporte de Caso—Septicemia aguda causada por Streptococcus gallolyticus subsp. pasteurianus en pavipollos.

Streptococcus gallolyticus, anteriormente conocido como Streptococcus bovis biotipos I y II/2, es una causa muy conocida de sepsis y meningitis en los seres humanos y aves. El presente reporte de caso describe un brote de septicemia fatal asociada con S. gallolyticus subsp. pasteurianus (S. bovis biotipo II/2) en 11 lotes de pavos en Pennsylvania entre los años 2010 y 2013. Los pavos afectados tenían entre 2 a 3 semanas de edad. La principal observación clínica fue el repentino incremento en la mortalidad entre los pavos jóvenes sin signos clínicos sugestivos. Los hallazgos durante el examen postmortem revelaron septicemia aguda con lesiones tales como pericarditis fibrinosa, meningitis, necrosis esplénica fibrinoide multifocal, hepatitis, osteocondritis, miositis y aerosaculitis. Se aislaron cocos gram positivos de varios órganos mediante el cultivo bacteriano de rutina. La biotipificación identificó a las bacterias como estreptococos, mientras que la secuenciación del gene de ARN ribosomal 16S las identificó como S. gallolyticus subsp. pasteurianus. Los perfiles de susceptibilidad a los antibióticos revelaron que todas las cepas aisladas eran sensibles a la penicilina y a la eritromicina con diferentes perfiles de sensibilidad para otros agentes antibacterianos ensayados. El presente estudio reporta el primer caso confirmado de septicemia aguda en pavipollos causado por S. gallolyticus subsp. pasteurianus.

Mycoplasma iowae, an occasional pathogen of turkeys, was isolated for the first time from captive grey partridges (Perdix perdix). Clinical signs including respiratory and intestinal disorder were seen in birds of all ages but mainly in those kept housed during rearing. Mortality rates averaged over 20% during the year. Treatment with antibiotics and antiparasitic drugs produced only a transient improvement in condition. The gross pathology findings included poor body growth, lack of development of the breast muscles, abnormalities in the keel development, and bone fragility. Some birds showed infraorbital sinusitis with serous or fibrinous exudates and catarrhal tracheitis, while others presented serofibrinous airsacculitis and splenomegaly. Laboratory investigations revealed pure cultures of M. iowae in the gut as well as sinus and air sacs. While other organisms such as coccidia, Trichomonas, Escherichia coli, Clostridium perfringens, and Aspergillus spp. were detected, the similarity of the disease with that seen in turkeys infected with M. iowae strongly suggests that this mycoplasma may be the primary pathogen here. The presence of M. iowae in game birds commonly released into the wild could have serious implications particularly in areas where industrial poultry farms are concentrated.

Reporte de Caso—Primer aislamiento de Mycoplasma iowae en parvadas de perdiz pardilla.

El Mycoplasma iowae, un patógeno ocasional de pavos, fue aislado por primera vez de perdices pardillas en cautiverio. Los signos clínicos que incluyeron problemas respiratorios e intestinales se observaron en aves de todas las edades, pero principalmente en las que se mantuvieron alojadas durante la crianza. Las tasas de mortalidad mostraron promedios de más de 20% durante el año. El tratamiento con antibióticos y antiparasitarios produjo sólo una mejora transitoria de la condición. Los hallazgos patológicos macroscópicos incluyen pobre crecimiento corporal, falta de desarrollo de los músculos del pecho, anormalidades en el desarrollo de la quilla y fragilidad de los huesos. Algunas aves mostraron sinusitis infraorbitaria con exudados serosos o fibrinosos y traqueítis catarral, mientras que otros presentaron aerosacculitis serofibrinosa y esplenomegalia. Los hallazgos de laboratorio revelaron cultivos puros de M. iowae en el intestino, así como en los senos y en los sacos aéreos. Aunque se detectaron otros organismos como coccidias, Trichomonas, Escherichia coli, Clostridium perfringens, y Aspergillus spp., la similitud de la enfermedad que se observa en los pavos infectados con M. iowae sugirió fuertemente que este micoplasma podía ser el patógeno primario de este problema. La presencia de M. iowae en aves de caza comúnmente liberadas a la naturaleza podría tener graves consecuencias sobre todo en las zonas donde se concentran granjas avícolas industriales.

A 15-yr-old cockatiel (Nymphicus hollandicus) presented with decreased activity and appetite. A presumptive diagnosis of lymphoproliferative disease was made because of a monoclonal band observed on plasma protein electrophoresis. The owner declined further diagnostics or treatment, and the bird died 2 yr later. In a second case, a 4-yr-old blue and gold macaw (Ara ararauna) presented with lethargy and anorexia. Despite supportive treatment, the bird died 7 days later. Blood studies also demonstrated a monoclonal band on plasma protein electrophoresis. The histologic review of tissues from both birds found extensive neoplastic lymphoplasmocytic cells in the liver and supported a diagnosis of lymphosarcoma.

Reporte de Caso–Hiperglobulinemia monoclonal de linfosarcoma en una cacatúa ninfa (Nymphicus hollandicus) y en un guacamayo azul y amarillo (Ara ararauna).

Se presentó una cacatúa ninfa de 15 años (Nymphicus hollandicus) con disminución en la actividad y en el apetito. Se llegó a un diagnóstico presuntivo de una enfermedad linfoproliferativa por la banda monoclonal observada en la electroforesis de proteínas plasmáticas. El propietario declinó realizar diagnósticos o tratamiento posteriores, y el ave murió dos años después. En un segundo caso, se presentó un guacamayo azul y amarillo (Ara ararauna) de cuatro años que presentaba letargia y anorexia. A pesar del tratamiento sintomático, el ave murió siete días después. Los estudios hematológicos también demostraron una banda monoclonal en la electroforesis de proteínas plasmáticas. El análisis histológico de los tejidos de ambas aves mostró presencia extensa de células linfoplasmocíticas neoplásticas en el hígado y apoyó un diagnóstico de linfosarcoma.

Polymelia was rarely recorded in birds; therefore, this report records the clinical and radiographic findings in a case of polymelia in a 7-mo-old layer Fayoumi chicken and the outcome of its amputation. The hen had two pericloacal extra limbs located caudal to the normal ones in an inverted position. The extra limbs were immovable and loosely attached to the underlying tissues. The supernumerary limbs had normal skin with ill-developed feathers. The extra limbs were fused proximally and crossed distally. Plain radiographic examination showed unequal numbers of bones and digits in both extra limbs. The right extra limb had a femur and tarsometatarsus while the left extra one had femur, tibiotarsus, and tarsometatarsus bones. The extra limbs appeared smaller than the normal ones and had neither muscles nor tendons. Amputation of the extra limbs under local infiltration analgesia was easy, safe, and curative.

Reporte de Caso–Amputación de extremidades en un ave de postura con polimelia.

La polimelia rara vez se ha registrado en las aves, por lo tanto este reporte describe los hallazgos clínicos y radiológicos de un caso de polimelia en un ave de postura de la raza Fayoumi de siete meses de edad y el resultado de un proceso de amputación. La gallina tenía dos extremidades adicionales pericloacales situadas caudalmente de las extremidades normales y en una posición invertida. Las extremidades adicionales no eran móviles y estaban unidas a los tejidos subyacentes. Los miembros supernumerarios tenían la piel normal con escaso desarrollo de plumas. Los miembros adicionales estaban fusionados proximalmente y distalmente cruzados. El examen radiográfico mostró un número desigual de huesos y de dedos en ambas extremidades adicionales. La extremidad adicional derecha tenía fémur y tarsometatarso mientras que la extremidad extra izquierda tenía fémur, tibiotarso y huesos tarsometatarsianos. Las extremidades adicionales estaban más pequeñas que los normales y no tenían músculos ni tendones. La amputación de las extremidades adicionales bajo analgesia por infiltración local fue fácil, segura y curativa.

In a breeding group of Inca terns (Larosterna inca), 14 birds died without antemortem signs of illness. Other than a poor body condition and a bloody cloaca, no symptoms were observed. Gross necropsy revealed severe segmental hemorrhagic enteritis with intralesional trematodes in most birds. Histopathologic examination revealed infiltration of lymphocytes, plasma cells, and granulocytes in the lamina propria of the duodenum and cross-sections of trematodes in the lumen. The parasites were identified as Ichthyocotylurus erraticus, a trematode of fish-eating birds. The cause of the infestation most likely was the feeding of unfrozen fresh fish. We describe the first case of a lethal I. erraticus infestation in Inca terns.

Reporte de Caso—Infestación fatal por Ichthyocotylurus erraticus en charranes inca (Larosterna inca) de una colección zoológica.

En un grupo de charranes inca (Larosterna inca), 14 aves murieron sin signos previos de enfermedad. Aparte de una condición corporal pobre y la presencia de cloacas sangrientas, no se observaron síntomas. La necropsia reveló enteritis hemorrágica segmentaria grave con trematodos dentro de las lesiones en la mayoría de las aves. El examen histopatológico reveló la infiltración de linfocitos, células plasmáticas y granulocitos en la lámina propia del duodeno y secciones transversales de trematodos en el lumen. Los parásitos fueron identificados como Ichthyocotylurus erraticus, un trematodo de las aves que se alimentan de peces. La causa más probable de la infestación fue por la alimentación de pescado fresco no congelado. Se describe el primer caso de una infestación letal por I. erraticus en charranes inca.

Blindness was observed in 10- to 14-day-old guinea fowl. The incidence ranged from 25% to 80% in nine flocks within a total population of 110,000 guinea fowls. Clinical signs of blindness in birds included aimless wandering, failure to find feed and water, lateral recumbency, loss of weight, and increased mortality. The birds lacked papillary reflexes to light, and there were no gross lesions in the eyes. Histologically there was degeneration and disorganization of photoreceptors in the retina. The guinea fowl came from three different breeder sources but all of the birds were given the same feed. The condition was not observed in the subsequent flocks that came from the same breeder sources but that were given different feed. Based on these observations, toxicity of an unknown ingredient in the feed is suspected as the cause of blindness in the guinea fowl.

Nota de Investigación—Brote de ceguera por retinopatía en nueve parvadas de gallinas de Guinea.

Se observó ceguera en gallinas de Guinea de diez a catorce días de edad. La incidencia osciló entre el 25% y el 80% en nueve parvadas dentro de una población total de 110,000 gallinas de Guinea. Los signos clínicos de la ceguera en las aves incluyeron desplazamiento sin rumbo definido, imposibilidad para encontrar alimento y agua, algunas aves estaban en decúbito lateral, pérdida de peso y aumento de la mortalidad. Las aves no presentaban reflejos papilares a la luz, y no hubo lesiones macroscópicas importantes en los ojos. Histológicamente había degeneración y desorganización de los fotorreceptores en la retina. Las gallinas de Guinea provinieron de tres fuentes de reproductoras distintas pero todas las aves recibieron la misma alimentación. La condición no se observó en las parvadas posteriores que provinieron de las mismas fuentes de reproductoras y que recibieron diferente alimentación. Con base en estas observaciones, se sospecha la toxicidad de un ingrediente desconocido en la alimentación la cual fue la causa de la ceguera en las gallinas de Guinea.